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PCR實(shí)驗(yàn)室知多少
PCR實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)在檢驗(yàn)科和病理科,其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法,應(yīng)用于:艾滋病檢測(cè)、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測(cè)和診斷,動(dòng)、植物檢疫等,化妝品、食品衛(wèi)生檢測(cè),轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測(cè)等。
由于該檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn),因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測(cè)部門的禽疫病診斷。但是,這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對(duì)安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來越得到重視,因?yàn)樗鼘?duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局闡述。
PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增分析區(qū)和洗消間。為避免交叉污染,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行,即只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→PCR擴(kuò)增分析區(qū)。
1、試劑準(zhǔn)備區(qū)
該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對(duì)與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。包含設(shè)備:超凈工作臺(tái)、醫(yī)用冷藏箱、低溫冰箱、離心機(jī)、旋渦混合器、紫外消毒車、移液器、吸頭。
2、樣本制備區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。包含設(shè)備:核酸提取儀、生物安全柜、水浴鍋(或者滅活儀)、醫(yī)用冷藏箱、低溫冰箱、離心機(jī)、旋渦混合器、紫外消毒車、移液器、吸頭、核酸提取試劑盒。
3、PCR擴(kuò)增分析區(qū)
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。包含設(shè)備:熒光定量PCR儀、離心機(jī)、紫外消毒車。
4、洗消間
該區(qū)域主要滅菌醫(yī)療垃圾。包含設(shè)備 高壓蒸汽滅菌器。
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